Gruppo Siniscalco

CENTRO DI RICERCA
dipartimento di medicina sperimentale, sezione di farmacologia, Seconda Università di Napoli, italia
Group Leader
Dario Siniscalco
dario.siniscalco@unicampania.it
Componenti
 
 
 
Interessi Scientifici
 
 
Cellule staminali ed autismo.
Utilizzo di cellule staminali mesenchimali per il recovery neuronale dopo trauma al sistema nervoso centrale e periferico.
Studio e caratterizzazione dell’apoptosi neuronale. Ruolo svolto dai membri della famiglia genica di bcl-2, dalle caspasi e dai geni regolatori del ciclo cellulare.
Regolazione dell’apoptosi in cellule staminali neuronali.
Caratterizzazione di un sistema sperimentale in vitro per lo studio dei pathways molecolari dell’apoptosi indotta da danno al DNA in cellule precursori dei neuroni (NPCs) del cervelletto.
Studio dei sistemi di espressione eterologa a basse temperature.
Studio dei meccanismi molecolari dell’adattamento della vita alle basse temperature. 
Attività Clinico/Assistenziale
 
 
Expertise
 
 
TECNICHE DI BIOCHIMICA
Metodiche di espressione di proteine eterologhe; lisi cellulare chimica e meccanica; sonicazione; omogenizzazione; estrazione e purificazione proteica (sia da organismi procarioti che eucarioti); SDS PAGE; Western blot; dot immunobinding; metodi per la determinazione della concentrazione proteica; saggi di attività enzimatica; ELISA.
TECNICHE DI BIOLOGIA MOLECOLARE
Ingegneria genetica, tecnologia del DNA ricombinante. Reazioni catalizzate da enzimi su DNA (es. idrolisi, defosforilazione, ligazione, polimerizzazione); clonaggio di geni; estrazione e purificazione di DNA plasmidico e genomico (da colture cellulari batteriche, colture cellulari eucariote, colture virali, tessuti); estrazione e purificazione di RNA (da colture cellulari eucariote, tessuti, tessuti in paraffina); PCR; RT-PCR; Real Time PCR; design di primers oligonucleotidici; sequenziamento di DNA; elettroforesi su gel per DNA e RNA; purificazione frammenti di DNA; tecniche per lo studio della variazione di espressione genica; concentrazione spettrofotometrica di DNA, RNA, proteine. Utilizzo di mouse knock out; tecniche per lo studio dei pathways di alterazione genica e tecniche per lo studio della morte cellulare programmata in animali knock out; tecniche per lo studio della variazione di espressione genica in seguito a trattamento farmacologico in vitro.
TECNICHE DI BIOLOGIA CELLULARE E MICROBIOLOGIA
Colture di cellule staminali mesenchimali (umane e murine); colture cellulari neuronali; colture cellulari di monociti umani, colture di cellule tumorali umane, colture cellulari di osteoclasti umani; colture cellulari batteriche; colture virali; modelli cellulari derivati da animali geneticamente modificati; curve di crescita; crioconservazione cellulare; preparazione di cellule competenti; trasformazione chimica; elettroporazione; coniugazione; infezione ed amplificazione virale; tecniche per l’induzione e lo studio di apoptosi in vitro; tecniche di sterilizzazione chimica e fisica.
TECNICHE DI CHIMICA ANALITICA
HPLC; GC-MS; spettrofotometria UV-VIS; estrazione con solventi, titolazioni e normali tecniche d’uso in laboratorio chimico.
TECNICHE DI MICROSCOPIA
Immunoistochimica; immunocitochimica; fissazione, disidratazione/reidratazione; preparazione vetrini; uso del criotomo e del microtomo; crioconservazione dei tessuti; colorazione di cellule e tessuti; microscopia ottica; microscopia di fluorescenza; tecniche di esposizione antigenica; double/triple staining; tecniche di amplificazione e rivelazione del segnale (es. cy3, cy3 plus, strep-cy3, FITC, DAPI, Quantum Dots, TSA); reazione TUNEL. Multi-label qunatum dot immunoistochemical detection procedure.
BIOINFORMATICA
PubMed, ChemSketch, Macplasmap, Chemfinder, Molecular Analyst (BioRad), Quantity One (BioRad), Basic Local Alignment Search Tool (BLAST), FASTA, PROW (Protein Reviews on the Web), Lasergene (DNASTAR), EditSeq, Oligo 4.05 (Primer Analysis Software – National Biosciences), Primer Express (Applied Biosystems), CLC DNA Workbench, Beacon Designer 3.01 (Premier Biosoft International), MicroPlate Manager (BioRad), KJ-Junior (Bio-Tek), Soft Max Pro (Molecular Devices), Axiovision 2.0 e 3.1 (Zeiss), IM1000 (Leica), NanoDrop 3.0.0, NanoDrop 1000 V 3.2.1.
RICERCA e LAB MANAGEMENT
Analisi dei dati; preparazione dati per presentazioni in riviste peer-reviewed ed in meetings, seminari, congressi; preparazione di manuscripts per riviste peer-reviewed. Preparazione di progetti di ricerca, richieste di finanziamenti. Organizzazione lab meeting, progress reports, talks. Lab safety.
Pubblicazioni caratterizzanti
 
 

 Brigida AL, Siniscalco D. Induced pluripotent stem cells as a cellular

model for studying Down Syndrome.

J Stem Cells Regen Med. 2016;12(2):54-60.

 

 Katuchova J, Harvanova D, Spakova T, Kalanin R, Farkas D, Durny P, Rosocha J, Radonak J, Petrovic D, Siniscalco D, Qi M, Novak M, Kruzliak P. Mesenchymal stem cells in the treatment of type 1 diabetes mellitus. Endocr Pathol. 2015;26(2):95-103.

 Bradstreet JJ, Sych N, Antonucci N, Klunnik M, Ivankova O, Matyashchuk I, Demchuk M, Siniscalco D. Efficacy of fetal stem cell transplantation in autism spectrum disorders: an open-labeled pilot study. Cell Transplant. 2014;23 Suppl 1:S105-12.

 Siniscalco D, Bradstreet JJ, Sych N, Antonucci N. Mesenchymal stem cells in treating autism: Novel insights. World J Stem Cells. 2014;6(2):173-8

 Siniscalco D, Bradstreet JJ, Sych N, Antonucci N. Perspectives on the use of stem cells for autism treatment. Stem Cells Int. 2013;2013:262438.

 Siniscalco D, Bradstreet JJ, Antonucci N. Therapeutic role of hematopoietic
stem cells in autism spectrum disorder-related inflammation. Front Immunol. 2013
 
Jun 10;4:140. doi: 10.3389/fimmu.2013.00140.

 Siniscalco D, Sapone A, Cirillo A, Giordano C, Maione S, Antonucci N. Autism
spectrum disorders: is mesenchymal stem cell personalized therapy the future? J
Biomed Biotechnol. 2012;2012:480289.

 Siniscalco D, Giordano C, Galderisi U, Luongo L, de Novellis V, Rossi F,
Maione S. Long-lasting effects of human mesenchymal stem cell systemic
administration on pain-like behaviors, cellular, and biomolecular modifications
in neuropathic mice. Front Integr Neurosci. 2011;5:79.

 Siniscalco D, Pandolfi A, Galderisi U. State-of-the-art on basic and applied
 
stem cell therapy; Stem Cell Research Italy-International Society for Cellular
Therapy Europe, Joint Meeting, Montesilvano (PE)-Italy, June 10-12, 2011. Stem
Cells Dev. 2012;21(5):668-9.

 Siniscalco D, Giordano A, Galderisi U. Novel insights in basic and applied
stem cell therapy. J Cell Physiol. 2012;227(5):2283-6.

  Siniscalco D. Transplantation of human mesenchymal stem cells in the study of
neuropathic pain. Methods Mol Biol. 2010;617:337-45.

Siniscalco D, Giordano C, Galderisi U, Luongo L, Alessio N, Di Bernardo G, de
Novellis V, Rossi F, Maione S. Intra-brain microinjection of human mesenchymal
stem cells decreases allodynia in neuropathic mice. Cell Mol Life Sci. 2010;67(4):655-69.

 D'Agostino B, Sullo N, Siniscalco D, De Angelis A, Rossi F. Mesenchymal stem 
cell therapy for the treatment of chronic obstructive pulmonary disease. Expert
Opin Biol Ther. 2010;10(5):681-7.

 Siniscalco D, Sullo N, Maione S, Rossi F, D'Agostino B. Stem cell therapy:
the great promise in lung disease. Ther Adv Respir Dis. 2008;2(3):173-7.

 D. Siniscalco, F. Rossi, S. Maione. Stem cell therapy for neuropathic pain treatment. Journal of Stem Cells and Regenerative Medicine 2008, vol III (1).

Strumentazioni disponibili
  Cell culture fully equipped lab.
Molecular biology lab: thermal cyclers, gel electrophoresis systems, Chemi/Gel Doc UV System, UV-Vis spectrophotometers, ultracentrifuges, microplate reader, western blot analysis system.
 
 
 
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